ABSTRACT

Antibiotic production is a feature of several kinds of soil bacteria and fungi and may represent a survival mechanism where microorganisms can eliminate competition and colonize a niche.  Soil samples were collected from 4 different mechanic workshops in Umuahia for the isolation and screening of microorganisms for antibiotic production. The media used for the isolation were Tryptone Soy agar, Sabouraud Dextrose agar and Nutrient agar. Sensitivity testing using Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Samonella typhi, and Enterococcus feacalis as test organisms was employed to determine the ability of bacterial and fungal isolates to produce antimicrobial substance. Six out of 38 isolates obtained from the soil samples possessed antimicrobial activity against at least three of the test organisms. The six isolates included Bacillus subtilis, Bacillus spp. Micrococcus spp. Sphingomonas spp. Aspergillus spp. and Acremonium chrysogenium. Of all the isolates, Bacillus spp. and Bacillus subtilis showed the greatest antimicrobial activity. Bacillus spp. inhibited Salmonella typhi, Escherichia coli, Staphylococcus aureus with zones of inhibition 12mm, 10mm, 12mm, respectively and Bacillus subtilis inhibited Salmonella typhi, Escherichia coli, and Staphylococcus aureus with zones of inhibition 13mm, 10mm, and 9mm. The extracellular substances produced by Bacillus spp, Bacillus subtilis, Micrococcus spp, Sphingomonas spp, Acremonium chrysogenium and Aspergillus spp which inhibited the growth of some test organisms can be used to produce potent antibiotics if harnessed and purified as those of commercially available antibiotics.

TABLE OF CONTENTS

Title page                                                                                                                  i

Certification                                                                                                              ii

Dedication                                                                                                                iii

Acknowledgements                                                                                                  iv

Table of Contents                                                                                                     v

List of Tables                                                                                                           viii

 List of Figures                                                                                                         ix

Abstract                                                                                                                    x

CHAPTER ONE

1.1 INTRODUCTION                                                                                             1

1.2 Aims and Objectives                                                                                          3

CHAPTER TWO

2.0 LITERATURE REVIEW                                                                                  4

2.1 Soil                                                                                                                     4

2.1.1 The Soil of Mechanic Workshop                                                                    5

2.2.2 Soil Bacteria                                                                                                 6

2.2 Antibiotics                                                                                                          6

2.3 Antibiotic Producing Organism                                                                           7                      

2.4 Antibiotic Resistance                                                                                           8

2.5 Previous Studies on Antibiotic Production                                                          9

2.6 Mechanism of Antibiotics Resistance                                                                 10

2.7 The Need for New Antibiotics                                                                            11

2.8. Production of Antibiotics                                                                                   12

CHAPTER THREE

3.0 MATERIALS and METHODS                                                                           14

3.1 Sample Collection                                                                                               14

3.2 Microbiological Methods                                                                                    14

3.3 Media and Media Preparation                                                                             14

3.4 Isolation of Soil Microorganism                                                                          14

3.5 Subculturing / Purification of Isolates                                                                 15

3.6 Preparation of Inoculum of Test Organism                                                         15

3.7 Screening for Antibacterial Activity                                                                   15

3.8 Characterization and Identification of Isolates                                                   16

3.8.1 Gram Staining                                                                                                  16

3.8.2 Biochemical Testing                                                                                        16

3.8.2.1 Indole Test                                                                                                       16

3.8.2.2 Citrate Utilization Test                                                                                    16

3.8.2.3 Starch Hydrolysis                                                                                            17

3.8.2.4 Catalase Test                                                                                                   17

3.8.2.5 Hydrogen Sulfide Production                                                                          17

CHAPTER FOUR

4.0 RESULTS                                                                                                              18

CHAPTER FIVE

5.1 DISCUSSION                                                                                                         25

5.2 Conclusion                                                                                                              26

5.3 Recommendation                                                                                                    27

References                                                                                                                   28